系统性红斑狼疮病人自身抗体的变化及意义
时间：
刘丰海 原江水 宋卫青1由 分享
【关键词】 红斑狼疮,系统性；自身抗体；诊断
系统性红斑狼疮(SLE) 是一种多器官、多系统的复杂自身免疫性疾病, 以自身抗体的产生和免疫复合物的聚集为特征。研究表明, SLE病人在严重的免疫功能异常，表现为淋巴细胞减少,淋巴细胞亚群异常,B 细胞异常活跃,病人体内产生多种自身抗体,如抗核抗体（ANA）、抗双链DNA（dsDNA）抗体和可提取性核抗原（ENA）抗体。本文对SLE病人血清中的自身抗体进行检测分析，旨在探讨这些自身抗体在SLE发病和诊断中的作用。
1 临床资料
1.1 一般资料
收集2007年1～12月在我院诊断为SLE的病人血清262份，诊断均符合1982 年美国风湿病学会修订的SLE分类标准。262例中，男35例，女227例；年龄18～75岁，平均（38.3±15.6）岁。另选健康查体者96例作为正常对照组，男21例，女75例；年龄21～76岁，平均（45.5±14.2）岁。
1.2 检测方法
①应用间接免疫荧光法检测病人血清中的ANA，选用人上皮细胞Hep2和大鼠肝组织切片作为抗原，试剂为德国欧蒙公司产品。待检血清行1∶100稀释，阳性者再做1∶1 000和1∶10 000稀释，稀释标本与抗原在生物薄片反应板上共同孵育30 min，洗片，加入FITC标记的二抗孵育30 min，洗片，甘油封片，荧光显微镜下观察反应结果。②免疫印迹法检测ENA多肽抗体谱：包括抗dsDNA抗体、抗SSA、抗SSB、抗Sm和抗U1?RNP等，试剂均为德国欧蒙公司产品。将包被了抗原的实验膜条平放于温育槽中，加入1.5 mL缓冲液，振荡孵育5 min，弃液，加入1.5 mL已稀释的1∶100待检血清，振荡孵育30 min，清洗液清洗3次，每次5 min，加入酶标记的抗人IgG血清再振荡孵育30 min，清洗3次后加底物显色，以试剂公司提供的阳性质控条带标准判断膜条上的阳性结果。
1.3 检测结果
1.3.1 ANA 262例SLE病人ANA滴度1∶100阳性者253例（96.5%），1∶1 000阳性者153例（58.3%），1∶10 000阳性者58例（22.1%），且荧光类型多为核均质型和核颗粒型。正常对照组96例中ANA滴度1∶100阳性者8例（8.3%），无1∶1 000和1∶10 000阳性者。SLE病人的ANA阳性率显著高于对照组，差异具有显著性（χ2=276.8，P<0.01）。
1.3.2 ENA抗体谱 262例SLE病人抗dsDNA抗体阳性者138例（52.7%），抗SSA抗体阳性者92例（35.1%），抗SSB抗体阳性者54例（20.6%），抗Sm抗体阳性者33例（12.5%），抗U1?RNP抗体阳性者56例（21.3%）。正常对照组96例均为阴性。
2 讨论
随着实验方法的不断改进及医学生物学的进步,对ANA的理解已不再局限于核成分,而是指抗核酸和核蛋白抗体的总称,其靶抗原分布不仅存在于细胞核,还包括细胞浆、细胞骨架、细胞的分裂周期等,ANA检测是一个重要的SLE筛选试验。本文中262例病人血清ANA的阳性率为96.5%,与文献报道基本一致[1]。但ANA出现在多种风湿病中,在某些肝病病人血清中也检测出ANA,所以ANA在SLE的诊断中仅有筛查价值。SLE的特征是产生大量致病性ENA,尤其是抗dsDNA抗体具有较高特异性,几乎仅发现于SLE病人中。本研究中以免疫印迹法检测抗dsDNA抗体的阳性率为52.7％。
SLE病人外周血大量凋亡淋巴细胞可通过释放过量自身抗原的方式诱导一系列自身抗体的产生，从而参与SLE发生[2]。其中，ENA是在盐水中可溶解的一系列抗原,在各种自身免疫性疾病中呈现不同的组合。检测这些抗体,除有助于SLE的诊断和分型外,还有助于检测病人的伴发疾病。抗dsDNA抗体与SLE活动相平行,可作为治疗评估指标,对SLE的诊断灵敏度低但特异度高。抗Sm抗体是SLE的标志性抗体，只表达于SLE病人中,特异性达到100%,但阳性率只有12.5%。抗SSA抗体和抗SSB抗体主要见于干燥综合征的病人中,其在SLE病人中阳性率也较高,分别达到35.1%和20.6%,此与SLE病人常并发干燥综合征有关。多个自身抗体的联合检测, 可提高SLE免疫学诊断的阳性率,弥补某个指标呈阴性时难以判定的不足。
【参考文献】
[1]邹自英,李素华,陈莉. 13种自身抗体检测对SLE的诊断价值及临床意义[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2007,23(5):443?446.
[2]初开秋,韩俐. SLE病人外周血淋巴细胞早期凋亡状态的检测[J]. 齐鲁医学杂志, 2003，18（1）：15?17.
系统性红斑狼疮(SLE) 是一种多器官、多系统的复杂自身免疫性疾病, 以自身抗体的产生和免疫复合物的聚集为特征。研究表明, SLE病人在严重的免疫功能异常，表现为淋巴细胞减少,淋巴细胞亚群异常,B 细胞异常活跃,病人体内产生多种自身抗体,如抗核抗体（ANA）、抗双链DNA（dsDNA）抗体和可提取性核抗原（ENA）抗体。本文对SLE病人血清中的自身抗体进行检测分析，旨在探讨这些自身抗体在SLE发病和诊断中的作用。
1 临床资料
1.1 一般资料
收集2007年1～12月在我院诊断为SLE的病人血清262份，诊断均符合1982 年美国风湿病学会修订的SLE分类标准。262例中，男35例，女227例；年龄18～75岁，平均（38.3±15.6）岁。另选健康查体者96例作为正常对照组，男21例，女75例；年龄21～76岁，平均（45.5±14.2）岁。
1.2 检测方法
①应用间接免疫荧光法检测病人血清中的ANA，选用人上皮细胞Hep2和大鼠肝组织切片作为抗原，试剂为德国欧蒙公司产品。待检血清行1∶100稀释，阳性者再做1∶1 000和1∶10 000稀释，稀释标本与抗原在生物薄片反应板上共同孵育30 min，洗片，加入FITC标记的二抗孵育30 min，洗片，甘油封片，荧光显微镜下观察反应结果。②免疫印迹法检测ENA多肽抗体谱：包括抗dsDNA抗体、抗SSA、抗SSB、抗Sm和抗U1?RNP等，试剂均为德国欧蒙公司产品。将包被了抗原的实验膜条平放于温育槽中，加入1.5 mL缓冲液，振荡孵育5 min，弃液，加入1.5 mL已稀释的1∶100待检血清，振荡孵育30 min，清洗液清洗3次，每次5 min，加入酶标记的抗人IgG血清再振荡孵育30 min，清洗3次后加底物显色，以试剂公司提供的阳性质控条带标准判断膜条上的阳性结果。
1.3 检测结果
1.3.1 ANA 262例SLE病人ANA滴度1∶100阳性者253例（96.5%），1∶1 000阳性者153例（58.3%），1∶10 000阳性者58例（22.1%），且荧光类型多为核均质型和核颗粒型。正常对照组96例中ANA滴度1∶100阳性者8例（8.3%），无1∶1 000和1∶10 000阳性者。SLE病人的ANA阳性率显著高于对照组，差异具有显著性（χ2=276.8，P<0.01）。
1.3.2 ENA抗体谱 262例SLE病人抗dsDNA抗体阳性者138例（52.7%），抗SSA抗体阳性者92例（35.1%），抗SSB抗体阳性者54例（20.6%），抗Sm抗体阳性者33例（12.5%），抗U1?RNP抗体阳性者56例（21.3%）。正常对照组96例均为阴性。
2 讨论
随着实验方法的不断改进及医学生物学的进步,对ANA的理解已不再局限于核成分,而是指抗核酸和核蛋白抗体的总称,其靶抗原分布不仅存在于细胞核,还包括细胞浆、细胞骨架、细胞的分裂周期等,ANA检测是一个重要的SLE筛选试验。本文中262例病人血清ANA的阳性率为96.5%,与文献报道基本一致[1]。但ANA出现在多种风湿病中,在某些肝病病人血清中也检测出ANA,所以ANA在SLE的诊断中仅有筛查价值。SLE的特征是产生大量致病性ENA,尤其是抗dsDNA抗体具有较高特异性,几乎仅发现于SLE病人中。本研究中以免疫印迹法检测抗dsDNA抗体的阳性率为52.7％。
SLE病人外周血大量凋亡淋巴细胞可通过释放过量自身抗原的方式诱导一系列自身抗体的产生，从而参与SLE发生[2]。其中，ENA是在盐水中可溶解的一系列抗原,在各种自身免疫性疾病中呈现不同的组合。检测这些抗体,除有助于SLE的诊断和分型外,还有助于检测病人的伴发疾病。抗dsDNA抗体与SLE活动相平行,可作为治疗评估指标,对SLE的诊断灵敏度低但特异度高。抗Sm抗体是SLE的标志性抗体，只表达于SLE病人中,特异性达到100%,但阳性率只有12.5%。抗SSA抗体和抗SSB抗体主要见于干燥综合征的病人中,其在SLE病人中阳性率也较高,分别达到35.1%和20.6%,此与SLE病人常并发干燥综合征有关。多个自身抗体的联合检测, 可提高SLE免疫学诊断的阳性率,弥补某个指标呈阴性时难以判定的不足。
【参考文献】
[1]邹自英,李素华,陈莉. 13种自身抗体检测对SLE的诊断价值及临床意义[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2007,23(5):443?446.
[2]初开秋,韩俐. SLE病人外周血淋巴细胞早期凋亡状态的检测[J]. 齐鲁医学杂志, 2003，18（1）：15?17.